prosdo.ru 1
аминокислотной брожения бактерий,

Clostridium PROPIONICUM

Б. П. CARDOX 1 и Н. А. Баркер
Отдел питания растений, Университет Калифорнии, Беркли, Калифорния
Поступила в редакцию для публикации 26 августа 1946
Предыдущие документы от этой лаборатории описали изоляции от сада
почве или морской грязи несколько типов анаэробных бактерий, способных брожения
некоторых аминокислот и других азотистых соединений (Баркер, 1937, 1939, 1943;
Баркер и Beck, 1942).
 Настоящая работа посвящена выделению и ха-
характеризации двух анаэробы, которые были получены от черной грязи на обогащение
Ment культуры метод с использованием сред, содержащих аланин и глицин, соответственно,
как брожению субстратов (Кардон, 1942).
AL.VNlNK-FERME.VnNG БАКТЕРИЙ
Изоляция аланин брожения бактерии было достигнуто путем
Использование среды, содержащей аланин, 1; автолизат дрожжей, 1 т.;. м / 1 фосфат
буфера рН 7,0, 2-х томах;. и водопроводной воды, 100.
 Среда была сильно прививку
с черной грязи из залива Сан-Франциско и инкубировали при 37 С в полностью
заполненный стеклянной пробкой бутылку.
 В течение 48 часов среда становится мутным.
доминирующий организм подвижные, грамотрицательные мутить.
 Через 5 дней все аминокислоты
азота было л> ееп преобразуется в аммиак.
 Существовал никаких изменений в рН, так как
летучих кислот были сформированы в суммах, эквивалентных аммиака.
 Дистилляция
летучих кислот методом Duclaux указано 2:01 смеси пропионовой
и уксусной кислот.
После двух переводов в той же среде жидкости, организм был выделен
Метод пожать культуры.
 Для этого дрожжи автолизат был увеличен
для 3-х томах процентов обеспечить более адекватное питание без ненужного пользу-

ING общие гнилостные анаэробы.
 Никаких особых трудностей встретилось

в изоляции.
У молодых культур аланин брожения организме появляется как подвижных, грам-
отрицательное, что характерно веретенообразный стержень, происходящих отдельно или бо-
monly парами (рис. 1). Средний размер составляет 0,8 на 3,0 микрона. В старых
культурах клетки значительно различаются по размеру и форме.
 Споры не образуются
легко.
 Даже в старых культурах удар, в котором спор форме, наиболее обильно,
редко делают больше, чем треть клетки sporulate.
 Споры овальные и о
одна треть тех пор, пока спорангии (рис. 2).
 Они терминала или суб-
терминал, вызвать небольшое набухание клетки, и отдельно от спорангия
вскоре после того, как сформирован.
 Моторики связано с 3 до 5 pcritrichous жгутиковых Организм облигатных анаэробных и catalasc-отрицательными. Он растет
в изобилии в 16 до 24 часов при температуре от 28 до 37 С в благоприятной среде. жидкость
СМИ сначала стать равномерно мутным, а затем постепенно ясно после 3-х до 4 дней.
Глубокая колонии агара линзовидные с ровными краями.
Быстрая и обильный рост чистых культур могут быть получены в следующих
среда: аланин, 0,3; Бакто пептона, 0,3; Бакто дрожжевой экстракт, 0,4, т, / 1 фос-phate буфера рН 7,1, 0,5 т.;. насыщенный раствор сульфата кальция, 0,25 об.;

цистеина гидрохлорида, 0,02; MgSC> 4-7HA 0,005; FeS04-7Н20, 0,001, и рас-

пропашных воды, 100. Рост будет происходить в течение диапазоне рН от 5,8 до 8,6, оптимальное
находится между 7,0 и 7,4. Цистеин может быть заменен в качестве восстанавливающего агента
сульфида натрия. Тиогликолят не должен л> е использоваться, поскольку она является несколько ингибиторов
истории, в частности, когда концентрация превышает 0,02 процента.комплекс
питательной, таких как экстракт дрожжей существенно, почти не рост происходит в его отсутствие.
Кроме того пептона выгодно, но не существенно. Даже с дрожжами и
пептон, рост очень бедных при отсутствии аланина или одной из связанных ком-

фунтов, таких как лактат, пируват, акрилат, серин, треонин, или, которые легко

ферментированные. Глюкоза не атакуется этого организма
. c:\users\836d~1\appdata\local\temp\bonus.ssr10\media\image1.jpeg
Рис. 1. Clostridium propionicum
Штамм X2. С 3-DAV-старой культуры в жидком аланин, пептон, дрожжевой экстракт среду.
Эритрозин пятно. X 1000.

Ферментации аланин и родственных соединений из пропионовой кислоты
типа. '1 Он уравнение для разложения аланин
3 CH3CHNH3COOH + 2 H20 = 3 NH4+ 2 CH3СН2СООН +
CH3COOH+ С02.

Нет водорода или янтарная кислота образуется. Дополнительные данные о химической деятельности

этого организма будут представлены в другом месте.
Поскольку ни Clostridium с аналогичными характеристиками, кажется, был описан
ранее (Bergev и соавт., 1939), мы решили создать новый вид для
аланин брожения организма.Название Clostridium propionicum был выбран в качестве
и свидетельствуют о его катаболизм.
GLYOIN'K-FKKM ENTINO ОРГАНИЗМА
Обогащение и изоляция глицин брожения организм AC-
complished одним и тем же общим методам, используемым для Clostridium propionicum.
Первая среда обогащения культуры, состоящей из 1 процента глицина в водопроводной воде
сильно прививку грязью залива, дал энергичное брожение в течение 3 дней при

37 С. Все аминного азота превращается в аммиак и углекислый газ

c:\users\836d~1\appdata\local\temp\bonus.ssr10\media\image1.jpeg
Рис
. 2. Clostridium propionicum, показаны Споры
Санкт дождь X2. Fr <»м 7-дневных колонии анаэробных наклон аланин, пептон, дрожжевой экс-
тракта агара. Необработанный. Слегка не в фокусе. X 1800.

и уксусной кислоты были сформированы. Существовал также значительный производство
метана в первой и второй культур обогащения.
 В последующих переводов
добычи метана уменьшается, и вообще не был сформирован чистых культур
глицин брожения организма.
 Для передачи по обогащению культуры,
первоначальной среды была дополнена обычные соли и 1 объем процентов
автолизат дрожжей.
Преобладающей организма во всех культурах обогащение довольно большой
кокки.
 После трех переводов кокками был выделен с помощью твердой среде
содержащей 0,5 процента глицина, 3-х томах процентов автолизат дрожжей и соли.
Пять штаммы были получены все из которых были очень похожи по морфологии и
физиологии.
Кокками сильно грам-positive.3 клетки значительно различаются по размеру, даже

в молодых культурах, диапазон составляет от 0,7 до 2,5 микрона в диаметре, средний

составляет около 1,2 мкм. В каждой культуре немногие из клетки definintcly стержне-
образную форму.
 Клетки обычно встречаются в парах и в короткие, нерегулярные 4 - 6-элементная цепи
(Рис. 3).
 Неравномерность цепи предполагает, что организм может быть
могут делиться по двум или более осей.
 Малые кластеры клеток также произойти.
Организм облигатных анаэробных которые не растут на наблюдаемые
степени на сложных азотных или сахаросодержащих СМИ в отсутствие добавленного
глицина.
 Медленно, но обильный рост происходит в среде, содержащей глицин,
0,3; Бакто дрожжевой экстракт, 0,5; Бакто пептона, 0,5, и другие составляющие использовались
В среду для Clostridium propionicum.
 С обычной дистиллированной воды
часто токсичны для этого организма, то лучше использовать стекло-дистиллированная вода или 1:01
Смесь стекла дистиллированной и водопроводной воды.
 Оптимальное рН для роста в этом
среды около 7,2, диапазон составляет от 6,0 до 8,5.
 Инкубации от 48 до 72
часов, необходимых для получения умеренно бурный рост на 30 Рост С. немного
быстрее при температуре 37 С.
В жидких средах, глицин брожения кокками произрастает в основном в качестве sedimenton
снизу или вдоль нижней стенки контейнера, оставив решение ясно.
 Глубокий
агаре колонии белого до кремового цвета, и сферические с шероховатой поверхностью.
Клетки показывают умеренную активность каталазы.
Организм получает энергию путем брожения глицина в соответствии с
уравнение
4 CH2NH2COOH + 2 H20 = 4 NH3 + 3 CH3 COOH + 2 C02.
В эксперименте баланс брожения углерода восстановления составил 97 процентов, а

окислительно-восстановительные индексом 0,99.
 В стационарных культур нет заметного количества водорода

производится, и никакой другой газ выделяется так как углекислый газ сохраняется как
бикарбоната. В других условиях, однако, когда культура, колеблемый в кон-
такта с большим азота заполненные газом пространство, на целых 50 мМ водорода
сформирован на 100 мМ глицин брожения, и есть соответствующее увеличение
выход углекислого газа и снижение в уксусной кислоте.
Около 35 соединений были протестированы, чтобы увидеть, могут ли они заменить глицин, как
брожению подложки.
 К их числу относятся все общие аминокислоты, и не-
азотистые основания, такие как глюкоза, пируват, и гликолевой кислоты. Не под-
stitute был найден на глицин, серин и пирувата атакуют очень медленно, но
только в присутствии глицина, а не в его «отсутствие.Более полное обсуждение

биохимической деятельности организма будут даны в другом месте.